科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 观察胃癌组织肌球蛋白重链9(myosin heavy chain 9, MYH9)表达变化，探讨其对胃癌细胞增殖能力的影响。方法 自TCGA和GTEx数据库收集正常组织以及食管癌、胃癌、胆管癌、胶质瘤、急性髓系白血病、胰腺癌、胸腺瘤组织转录组测序数据，自TCGA数据库收集胃癌患者临床病理资料，比较不同癌组织与正常组织MYH9 mRNA相对表达量，分析MYH9表达与胃癌患者临床病理特征的关系。自Kaplan-Meier Plotter数据库收集胃癌患者生存资料，绘制Kaplan-Meier曲线，比较MYH9高、低表达胃癌患者总生存率、首次进展生存率、进展后生存率。采用实时荧光定量PCR法检测人皮肤成纤维细胞CCC-HSF-1和胃癌AGS、SNU16、HGC27细胞MYH9 mRNA相对表达量，筛选出表达最高的胃癌AGS细胞。取对数生长期AGS细胞，分为NC组(转染siRNA-NC)、siMYH9-1组(转染siMYH9-1)、siMYH9-2组(转染siMYH9-2)。转染48 h,采用实时荧光定量PCR法检测MYH9 mRNA相对表达量，采用Western blot法检测MYH9蛋白相对表达量，采用细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成数目，采用EdU实验检测EdU阳性细胞率；转染后培养0、24、48、72、96 h,采用CCK-8实验检测细胞增殖率。结果 数据库分析结果显示，胃癌组织MYH9 mRNA相对表达量高于正常组织(P<0.05);T分期T3～T4期、组织学分级G3级的胃癌患者MYH9高表达比率分别高于T分期T1～T2期、组织学分级G1～G2级者(P<0.05),不同性别、年龄以及有无幽门螺旋杆菌感染、胃癌家族史、淋巴结转移、远处转移的胃癌患者MYH9高表达比率比较差异均无统计学意义(P>0.05);MYH9高表达的胃癌患者总生存率、首次进展生存率、进展后生存率均低于MYH9低表达MYH9者(P<0.05)。AGS(2 486.02±332.36)、SNU16(729.16±166.39)、HGC27(652.05±92.48)细胞MYH9 mRNA相对表达量均高于CCC-HSF-1细胞(1.00±0.11)(P<0.05),SNU16、HGC27细胞MYH9 mRNA相对表达量均低于AGS细胞(P<0.05)。siMYH9-1组、siMYH9-2组细胞MYH9 mRNA(0.14±0.02、0.23±0.01)及蛋白(0.19±0.13、0.22±0.14)相对表达量、细胞克隆形成数目[(95.00±16.52)、(100.67±8.50)个]、EdU阳性细胞率[(23.03±1.98)%、(27.07±1.89)%]均低于NC组(1.00±0.12、0.83±0.11、(325.67±26.69)个、(51.52±2.58)%)(P<0.05),siMYH9-1组细胞MYH9 mRNA相对表达量低于siMYH9-2组(P<0.05),MYH9蛋白相对表达量、细胞克隆形成数目、EdU阳性细胞率与siMYH9-2组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。siMYH9-1组、siMYH9-2组转染后培养48 h[(49.20±0.85)%、(73.33±1.16)%]、72 h[(45.94±0.43)%、(59.50±1.22)%]、96 h[(36.41±1.68)%、(47.24±0.29)%]时细胞增殖率均低于NC组[(100.00±0)%、(100.00±0)%、(100.00±0)%](P<0.05),0、24 h时细胞增殖率与NC组比较差异均无统计学意义(P>0.05);siMYH9-2组转染后培养48、72、96 h时细胞增殖率均高于siMYH9-1组(P<0.05),0、24 h时与siMYH9-1组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 MYH9在胃癌组织中呈高表达，提示胃癌患者预后不良，敲低MYH9表达可抑制胃癌AGS细胞增殖。
-
单位郑州大学; 河南省人民医院
