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摘要
基于国标微生物法,开展关键试验条件优化研究,达到缩短检测周期、提高准确性和重复性的目的。在《GB5009.211-2014食品安全国家标准食品中叶酸的测定》的基础上,将活力增强2～3代后的菌株预先用50 mL含有25%甘油的叶酸测定用培养基混匀制成菌悬液并分装1.0mL至菌株保存管,-70℃冻存备用。并确定该批次菌株储备液适宜菌悬液浓度与培养时间的关系,同时对试样进行95℃,30min水浴直接提取的优化处理,通过比较国标微生物法和优化方法所作标准曲线的差异,分析准确性和重复性来验证优化方法的适用性。该批次菌株储备液以菌悬液浓度为透光率T=70%、接种量50μL、37℃培养40 h以上的试验,标准曲线线性关系与国标微生物法相当,R2值可达到0.99以上;优化方法和国标微生物法所测结果均与SRM 1849a质控样品的标示值相符,且相对于国标微生物法结果更准确,相对标准偏差(Relative Standard Deviation)RSD为1.61%;重复性试验的RSD分别为1.74%、3.67%、4.36%、5.85%和4.00%。接种液制备优化方法缩短了检测周期,操作简便、结果准确性和重复性好,能克服国标微生物法的缺陷与不足,为叶酸检测方法的改进提供参考。
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