pLEGFP-mIFNγ重组质粒的构建及神经干细胞转染

作者：刘颖; 陈东; 李菁华

来源：吉林大学学报(医学版), 2006, 32(4): 593-595.

DOI：10.3969/j.issn.1671-587X.2006.04.015

• pLEGFP-C1
• 质粒
• 干细胞
• 转染

目的:构建pLEGFP-mIFNγ真核表达质粒,以获得带有绿色荧光蛋白的γ干扰素融合蛋白.方法:以克隆质粒pcDNA3.1-mIFNγ为模板,用PCR方法扩增mIFNγ DNA 片段,利用pEGFP-C1质粒载体构建pLEGFP-mIFNγ重组质粒,用酶切电泳验证重组质粒的正确性.脂质体转染包装细胞PA317,利用PA317病毒上清转染神经干细胞.结果:PCR结果显示扩增片断大小约500 bp,与预期相同.重组质粒酶切后显示其大小约7 400 bp.pLEGFP-mIFNγ成功转染神经干细胞.结论:pLEGFP-mIFNγ质粒构建成功,能够有效转染神经干细胞,并进行示踪.

• 单位
  广东医科大学; 吉林大学; 基础医学院