猪流行性腹泻病毒G1/G2型RT-PCR鉴别诊断方法的建立及应用

作者:王若木; 孙连静; 赵硕; 钟莲; 袁婷婷; 陈樱; 韦祖樟; 黄伟坚*; 欧阳康*
来源:动物医学进展, 2020, 41(06): 38-41.
DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2020.06.007

摘要

为建立一种快速鉴别猪流行性腹泻病毒(PEDV)G1型/G2型感染的RT-PCR方法,基于PEDV的S基因和E基因序列分别设计了PEDV的分型引物和鉴别引物,经过敏感性试验、重复性试验等一系列反应条件的优化,成功建立了鉴别PEDV G1/G2型感染的双重RT-PCR方法;通过目的片段的数量来判断PEDV的感染类型,其中,PEDV G1型感染可扩增得到一条目的片段(249bp),G2型感染扩增得到两条目的片段(840bp和249bp)。利用该方法对采自广西不同地区的92份临床样品进行检测,结果显示,阳性样品55份,其中,G2型样品53份,G1型样品2份。结果表明该方法操作简易,具有良好的敏感性和特异性,能快速鉴别PEDV G1/G2型的感染。