基于嵌段式互补序列的无标记核酸适体荧光探针用于食品中金黄色葡萄球菌的快速检测

作者：郑毅; 陈果; 严杭丽; 王婧毓; 赵凤霞; 柏琴琴; 胡红梅; 梁好^*; 牛湘衡

来源：分析试验室, 2023, 1-10.

• 金黄色葡萄球菌
• 核酸适体
• 荧光探针
• 食品安全

以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus， S. aureus)为研究目标菌，开发了一种无标记核酸适体(aptamer)荧光探针，用于复杂食品基质中致病菌的快速检测。针对目标菌的aptamer，设计了全链的嵌段式互补序列，结合可特异性插入DNA双链结构并显著增强荧光发射的SYBR Green I(SG-I)染料，实现了探针的特异性识别和起始信号的双重放大。当目标菌存在时，由于探针中的互补序列为嵌段式，杂交作用力弱于S. aureus和aptamer的特异性结合。因此，目标菌能够与互补序列竞争aptamer，破坏DNA双链结构而释放SG-I，使得探针荧光显著降低。结果表明，在最佳实验条件下，该方法在1.00×102～1.00×109 CFU/mL范围内有良好的线性关系，回归方程为ΔF=221.0Logc+687.1，线性相关系数R2=0.9918，检出限可低至13 CFU/mL。该方法用于加标样品测定，加标回收率在95.2%～104.7%之间，相对标准偏差在3.9%～7.6%。

• 单位
  衡阳市疾病预防控制中心; 公共卫生学院; 南华大学