双调蛋白对支气管肺发育不良模型小鼠肺泡分化的影响

作者：尧惠慈; 卢红艳^*; 朱玥; 乔瑜; 季玮

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(01): 110-116.

• 支气管肺发育不良
• 肺泡分化
• 双调蛋白
• 表皮生长因子受体
• 小鼠

目的：通过构建高氧暴露所致小鼠支气管肺发育不良（BPD）模型，探讨双调蛋白（AREG）表达变化对肺泡分化的影响，为研究BPD肺泡化障碍的发病机制提供实验依据。方法：采用85%的氧浓度构建高氧暴露所致C57BL/6小鼠BPD模型，以小鼠置于同一室内空气中为对照，将小鼠随机分为7 d空气（N7）组、7 d高氧（H7）组、14 d空气（N14）组和14 d高氧（H14）组；在高氧状态下，通过腹腔注射重组小鼠AREG蛋白（rmAREG）构建AREG过表达模型，以腹腔注射PBS为对照，分为PBS组和rmAREG组，每组各5只；通过小鼠鼻内滴注AREG小干扰RNA(siRNA)慢病毒表达载体溶液构建AREG敲低模型，以滴注阴性对照慢病毒表达载体溶液为对照，分为病毒空载（NC）组和AREG敲低（KD）组，每组各5只。应用Western blot技术检测各组小鼠肺组织中AREG、表皮生长因子受体（EGFR）、Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECII）标志物肺泡表面活性蛋白C(SP-C)及Ⅰ型肺泡上皮细胞（AECI）标志物平足蛋白（T1α）的表达情况；应用免疫荧光技术检测小鼠肺组织中SP-C/T1α的荧光共定位情况。结果：（1）Western blot结果显示，与空气组比较，高氧组小鼠肺组织中AREG、EGFR和T1α蛋白表达水平升高（P<0.01）,SP-C蛋白表达水平降低（P<0.05），免疫荧光双标显示高氧组中SP-C与T1α共定位细胞较空气组显著减少（P<0.05）;(2)在高氧状态下过表达AREG后，Western blot结果显示，与PBS组相比，rmAREG组中AREG和EGFR蛋白表达升高（P<0.01）,SP-C和T1α蛋白表达降低（P<0.01），免疫荧光双标显示rmAREG组SP-C与T1α共定位细胞较PBS组显著减少（P<0.01）;(3)在高氧状态下敲低AREG后，Western blot结果显示，与NC组比较，KD组中AREG和EGFR蛋白表达降低（P<0.01）,SP-C和T1α蛋白表达升高（P<0.01），免疫荧光双标显示KD组SP-C与T1α共定位细胞较NC组显著增多（P<0.01）。结论：AREG参与了BPD模型小鼠肺泡分化障碍的病理生理过程，其机制可能与AREG抑制AECII向AECI分化有关。

• 单位
  江苏大学附属医院