三七总皂苷对H2O2诱导BMSCs凋亡的保护作用及机制研究

作者：王俊; 陈思思; 吴雪莉^*; 陆恵琴

来源：新中医, 2021, 53(19): 1-6.

DOI：10.13457/j.cnki.jncm.2021.19.001

• 三七总皂苷
• 骨髓间充质干细胞
• 凋亡
• ERK1/2

目的:体外观察三七总皂苷(tPNS)对过氧化氢(H2O2)诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs)凋亡的影响,并通过ERK1/2通路初步探讨t PNS的作用分子机制。方法:全骨髓贴壁法体外分离、培养SD大鼠BMSCs。不同浓度tPNS (25、50、100和200μg/mL)处理BMSCs 24 h后,用500μmol/L H2O2孵育细胞24 h诱导凋亡,后行MTT实验检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期。100μg/mL tPNS预处理24 h后,加ERK1/2抑制剂PD98059 (25μmol/L) 1 h,后用500μmol/L H2O2孵育细胞24 h诱导凋亡,用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;Western Blot检测细胞ERK1/2及其蛋白磷酸化的表达。结果:与对照组比较,其他各组存活率均显著降低(P<0.01);与H2O2组比较,100μg/mL和200μg/mL tPNS组均能显著提高BMSCs的存活率(P<0.01,P<0.05),其中100μg/mL效果更佳,所以采用最佳浓度组100μg/mL tPNS组进行后期研究。BMSCs经tPNS干预24 h后,100μg/mL和200μg/mL tPNS组细胞周期中G2+S期细胞数的比例较H2O2组明显增加(P<0.05),其中100μg/mL tPNS组较200μg/mL tPNS组更多;其他浓度tPNS组与H2O2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,其他各组凋亡率均升高(P<0.01);与H2O2组比较,t PNS组能显著降低BMSCs的凋亡率(P<0.01);与tPNS组比较,tPNS+PD98059组能显著升高BMSCs的凋亡率(P<0.05)。与对照组比较,H2O2组、tPNS+PD98059组能显著下调ERK1/2蛋白的磷酸化表达(P<0.01);与H2O2组比较,tPNS组、tPNS+PD98059组能显著上调ERK1/2蛋白的磷酸化表达(P<0.01);tPNS组与tPNS+PD98059组之间并没有显著差异。结论:t PNS对H2O2诱导的BMSCs凋亡有保护作用,其机制可能与促进ERK1/2蛋白的磷酸化表达有关。

• 单位
  贵州中医药大学; 中心实验室; 湖州市第三人民医院