绵羊痒螨兔亚种MMP2基因的转录水平及其重组蛋白间接ELISA的建立

作者：葛优; 郑晶; 蒲善秋; 周宇; 黄翠锐; 杨光友; 谢跃; 何冉; 徐璟; 古小彬^*

来源：畜牧兽医学报, 2022, 53(02): 567-575.

• 绵羊痒螨兔亚种
• MMP2
• 转录水平
• 原核表达
• 间接ELISA

本研究旨在分析绵羊痒螨兔亚种MMP2基因(PocMMP2)的虫体转录水平，及建立针对重组PocMMP2(rPocMMP2)蛋白抗体的间接ELISA检测方法(iELISA)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定PocMMP2在不同发育阶段虫体、饱食与饥饿虫体的转录水平，采用原核表达系统获得rPocMMP2,经方阵滴定法优化反应条件，建立rPocMMP2-iELISA,并用该方法检测成都地区有痒螨病流行病史兔场的86份兔血清。结果显示：PocMMP2在雌虫、雄虫、若虫和幼虫阶段均有表达，且在饥饿虫体的转录水平显著高于饱食虫体(P<0.05);rPocMMP2约72 ku,主要存在于包涵体中；rPocMMP2-iELISA临界值为0.223,敏感性和特异性分别为86.0%和83.3%,受试者工作曲线下面积(AUC)为0.876,批内与批间重复性变异系数均小于10.00%;该方法的临床检测呈现74.42%的血清阳性检出率(64/86),高于病原学检出率(10.47%,9/86)。PocMMP2可能参与了绵羊痒螨兔亚种发育和入侵宿主过程，且所建立的rPocMMP2-iELISA有良好的敏感性、特异性和较高的重复性，可用于兔痒螨病的血清抗体检测。

• 单位
  四川农业大学