MAGE-3基因稳定转染的HHCC细胞系的建立及其mRNA的表达

作者：张秀敏; 隋延仿; 司少艳; 李侠; 黄杨; 胡沛臻; 葛伟

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2006, (04): 450-451+453.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.003950

• 黑色素瘤抗原-3
• 基因转染
• 绿色荧光蛋白
• 肿瘤
• 免疫治疗

目的:构建肿瘤抗原MAGE-3基因的真核表达载体,建立MAGE-3基因稳定转染的人肝细胞癌细胞系(humanhepatocellularcarcinomacellline,HHCC)。方法:利用分子生物学方法,构建带有MAGE-3基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的重组真核表达质粒pIRES2-EGFP-MAGE-3,经脂质体法转染HHCC后,用G418筛选阳性克隆。在荧光显微镜下观察HHCC中EGFP的表达,用RT-PCR法检测HHCC中MAGE-3mRNA的表达。结果:成功地构建了重组真核表达载体pIRES2-EGFP-MAGE-3。以其转染HHCC后,经荧光显微镜及RT-PCR分别检测到MAGE-3mRNA转录和EGFP的表达。结论:建立了1株可稳定转染MAGE-3基因的肝细胞癌HHCC,为进一步应用该基因进行肝癌的免疫治疗提供了实验依据。

• 单位
  第四军医大学