MiR-340介导高迁移率组蛋白盒1参与肝纤维化发病的机制

作者：李沙陵; 易盼盼; 陈若蝉; 黄泽炳; 胡兴旺; 范学工^*

来源：中华肝脏病杂志, 2023, 31(01).

• 肝纤维化
• 细胞外基质沉积
• miR-340
• 高迁移率组蛋白盒1

目的探讨miR-340/高迁移率组蛋白盒1(HMGB1)轴在肝纤维化形成过程中的作用机制。方法腹腔注射四氯化碳构建大鼠肝纤维化模型;基因芯片筛选正常和肝纤维化大鼠差异表达的miRNA后选择其中可靶向HMGB1的miRNA并验证, qPCR检测miRNA表达变化对HMGB1水平的影响;双荧光素酶报告基因实验(LUC)验证miR-340和HMGB1间的靶向关系;miRNA mimics和HMGB1过表达载体共转染后, 噻唑蓝(MTT)法检测肝星状细胞系HSC-T6的增殖活性, 蛋白质印迹法检测细胞外基质(ECM)标志物I型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达。采用方差分析和LSD-t检验进行统计学分析。结果苏木精-伊红及Masson染色结果表明大鼠肝纤维化模型构建成功;芯片分析和生物信息学预测得到8个可能靶向HMGB1的miRNA, 动物模型验证得到miR-340;qPCR检测结果表明miR-340可抑制HMGB1表达, 荧光素酶互补实验提示miR-340可靶向结合HMGB1;功能实验结果表明HMGB1过表达可增强细胞增殖活性和I型胶原、α-SMA的表达, 而miR-340 mimics不仅可抑制细胞增殖活性和HMGB1、I型胶原、α-SMA的表达, 还可部分逆转HMGB1对细胞增殖和ECM合成的促进作用。结论 miR-340靶向HMGB1抑制肝星状细胞增殖和ECM沉积, 在肝纤维化进程中发挥保护作用。

• 单位
  中南大学湘雅医院