摘要
目的 探讨circSERPINE2对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞炎症反应、细胞凋亡的影响及其对miR-34a-5p的调控作用。方法 体外培养肺泡上皮细胞A549,随机分为对照组、感染组、感染+pcDNA组、感染+pcDNA-circSERPINE2组、感染+anti-miR-NC组、感染+anti-miR-34a-5p组、感染+pcDNA-circSERPINE2+miR-NC组、感染+pcDNA-circSERPINE2+miR-34a-5p组;采用qRT-PCR法检测circSERPINE2与miR-34a-5p的表达量;采用ELISA法检测IL-10、IL-6的水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验检测circSERPINE2与miR-34a-5p的靶向关系。采用Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达量。结果 与对照组比较,感染组circSERPINE2的表达水平降低(P<0.05),miR-34a-5p的表达水平升高(P<0.05),IL-10的水平和Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),IL-6的水平、细胞凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05);转染pcDNA-circSERPINE2或转染anti-miR-34a-5p后,IL-10的水平和Bcl-2蛋白水平升高(P<0.05),IL-6的水平、细胞凋亡率和Bax蛋白水平降低(P<0.05);circSERPINE2可靶向负调控miR-34a-5p的表达;共转染pcDNA-circSERPINE2与miR-34a-5p mimics可恢复转染pcDNA-circSERPINE2对细胞炎症及细胞的作用。结论 circSERPINE2过表达可通过下调miR-34a-5p的表达抑制炎症反应及细胞凋亡从而减轻肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤。
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