CRIF1基因的克隆表达

作者：冉茜; 单佑安; 李忠俊

来源：中国输血杂志, 2010, 23(12): 1018-1020.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2010.12.034

• 细胞周期
• CRIF1
• 白血病

目的克隆表达CRIF1基因蛋白,为进一步研究该基因在骨髓微环境诱导白血病细胞G0/G1期阻滞过程中作用以及相关机制奠定基础。方法自HL60细胞中提取总RNA、逆转录,并与pET32a构建融合蛋白表达载体、蛋白原核表达载体;优化蛋白表达诱导条件,蛋白纯化;SDS-PAGE、Western Blot检测目的蛋白的表达。结果克隆并经测序获得全长744bp的CRIF1基因,成功构建融合蛋白表达载体和原核表达载体,优化并纯化蛋白;SDS-PAGE在42.5 kD处获得目的条带,Western Blot检测确定为CRIF1表达蛋白。结论成功克隆表达出CRIF1基因蛋白。

• 单位
  第三军医大学附属新桥医院