利用CRISPR/Cas9构建甲基丙二酸血症cblC型W203X突变小鼠模型

作者：马飞; 石聪聪; 梁普平; 李思涛; 古霞; 肖昕; 郝虎^*

来源：中国当代儿科杂志, 2019, 21(08): 824-829.

DOI：10.7499/j.issn.1008-8830.2019.08.016

• 甲基丙二酸血症cblC型
• CRISPR/Cas9技术
• W203X突变
• 小鼠模型

目的利用CRISPR/Cas9技术构建与人甲基丙二酸血症cblC型W203X突变型一致的小鼠模型。方法通过BLAST比对人和小鼠cblC基因和蛋白序列的保守性,应用CRISPR/Cas9技术进行小鼠受精卵显微注射,获得杂合子F1代小鼠,F1代小鼠通过杂交获得W203X纯合突变型小鼠,并对纯合突变型、同窝杂合型及野生型3种类型小鼠进行血代谢产物丙酰肉碱检测。结果人和小鼠甲基丙二酸血症cblC型的致病基因MMACHC的核苷酸和氨基酸序列高度保守。通过CRISPR/Cas9技术成功获得W203X纯合突变型小鼠,该小鼠模型在生后24 h丙酰肉碱明显升高(P<0.001)。结论利用CRISPR/Cas9技术成功构建了与人甲基丙二酸血症cblC型W203X突变型一致的小鼠模型。[中国当代儿科杂志,2019,21(8):824-829]

• 单位
  中山大学附属第六医院; 中山大学生命科学学院