腺相关病毒介导神经生长因子对大鼠脑损伤的保护作用

作者：张辉; 杨林; 杨帆; 陈培莉^*

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(08).

• 颅脑损伤
• 神经生长因子
• 基因治疗
• 细胞凋亡

目的探讨腺相关病毒介导神经生长因子(NGF)对大鼠脑损伤的保护作用及其机制。方法 2018年11月到2019年11月, 将购自河南省实验动物中心的45只SD随机分为对照组、模型组和NGF组, 每组15只。采用自由落体法建立大脑急性脑损伤大鼠模型, 对照组和模型组大鼠建模后经颅内注射携带空载体的腺相关病毒1×1010 vg, NGF组大鼠建模后经颅内注射携带NGF的腺相关病毒1×1010 vg, 3组在治疗2周后, 采用神经行为学评分评价大鼠神经功能症状, 采用Morris水迷宫实验评估3组大鼠空间学习记忆能力;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析3组大鼠脑组织凋亡, 采用蛋白质印迹法(Western blot)分析3组大鼠脑组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果与模型组神经损伤程度评分[(11.24±3.99)分]比较, NGF组大鼠神经损伤程度评分[(6.09±4.11)分]显著下降, 差异有统计学意义(t=3.011, P<0.05)。与模型组逃避潜伏期[(29.55±5.94) s]比较, NGF组大鼠逃避潜伏期[(17.19±3.84) s]显著下降, 差异有统计学意义(t=3.415, P<0.05)。与模型组穿台指数(1.54±1.09)比较, NGF组大鼠穿台指数(3.58±2.10)显著下降, 差异有统计学意义(t=3.001, P<0.05)。与模型组大鼠脑细胞凋亡率[(31.58±6.04)%]比较, NGF组大鼠大鼠脑细胞凋亡率[(15.87±4.28)%]显著下降, 差异有统计学意义(t=3.841, P<0.05)。与对照组大鼠脑组织Caspase-3和bax表达水平(0.25±0.09、0.15±0.08)比较, 模型组脑组织Caspase-3和bax表达水平显著增加(0.94±0.15、1.18±0.18), 差异有统计学意义(t=3.491、2.192, P<0.05)。与模型组大鼠脑组织Caspase-3和bax表达水平(0.94±0.15、1.18±0.18)比较, NGF组大鼠脑组织Caspase-3和bax表达水平显著下降(0.39±0.12、0.28±0.14), 差异有统计学意义(t=3.718、2.004, P<0.05)。结论腺相关病毒介导NGF在通过抑制脑组织细胞凋亡, 可显著改善脑组织神经功能, 提高学习和记忆能力。

• 单位
  商丘市第一人民医院; 徐州医科大学; 河南省人民医院