双自杀基因CD、HSV-tk共表达对肝门部胆管癌细胞杀伤作用实验研究

作者：李志伟; 王占民; 吴小鹏; 刘春生; 马道新; 刘博

来源：中国现代普通外科进展, 2004, (01): 19-22.

• 逆转录病毒科
• 自杀基因
• 胆管肿瘤
• 基因疗法

目的 :观察逆转录病毒介导的双自杀基因CD、HSV tk共表达对肝门部胆管癌细胞FRH的杀伤作用 ,探讨肝门部胆管癌的基因治疗方法。方法 :在脂质体Lipofectamine的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PwzlneoCDglytk转导入包装细胞PA317,经G4 18筛选后培养产病毒的阳性克隆PA317/CD +tk细胞株 ,收集其病毒上清 ,转染FRH细胞 ,再次经G4 18筛选 ,获得稳定表达双自杀基因的FRH/CD +tk细胞株 ,用RT PCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物 5 氟胞嘧啶 (5 flourocyto sine,5 Fc)和 /或无环鸟苷 (Ganciciovir,GCV)后 ,用MTT法测定转基因组及未转基因组FRH细胞的存活率。结果 :双自杀基因在FRH细胞中可稳定表达 ,联合使用 5 Fc和GCV对靶细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用 5 Fc或GCV。结论 :逆转录病毒介导自杀基因可有效杀死肝门部胆管癌细胞 ,双自杀基因共表达较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用。

• 单位
  山东大学齐鲁医院