人源抗狂犬病毒二硫键稳定抗体在大肠杆菌中的融合表达

作者：蔡昆; 王慧; 史晶; 包士中; 侯晓军; 荫俊

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2007, (05): 450-452.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.004227

• 抗狂犬病毒二硫键稳定抗体
• MBP融合蛋白
• 原核表达 anti-rabies ScdsFv
• MBP fusion protein
• prokaryotic expression

目的在大肠杆菌pMAL-P2x系统中表达anti-rabiesMBP-ScdsFv融合蛋白,酶切获得目的蛋白ScdsFv,进行纯化、鉴定及简单活性分析。方法利用DNA重组技术,将全长的ScdsFv蛋白基因克隆至原核表达载体pMAL-p2x中,重组质粒转化大肠杆菌E.coliER2566,IPTG诱导表达。表达产物经Xa酶切后,经Ni柱、AmyloseResin亲和层析进行纯化,SDS-PAGE和Western blot对其进行鉴定,ELISA检测其结合活性。结果成功地构建了重组质粒pMAL-ScdsFv,经诱导表达、蛋白酶切、亲和纯化后获得目的蛋白。ELISA检测其具有抗原特异结合活性,其热稳...

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室