家蚕几丁质去乙酰化酶BmCDA2的基因表达和免疫定位

作者：何允; 陈怡菲; 王清浪; 张自钰; 董浩南; 申太霞; 侯勇; 龚竞^*

来源：生物工程学报, 2023, 39(04): 1655-1669.

DOI：10.13345/j.cjb.220472

• 家蚕
• 几丁质去乙酰化酶2
• 原核表达
• 免疫荧光定位

几丁质的去乙酰化修饰与昆虫的发育变态密切相关，几丁质去乙酰化酶(chitin deacetylase,CDA)是这个过程中的关键酶。家蚕(Bombyxmori)是鳞翅目昆虫的代表性昆虫，目前对家蚕CDAs的研究较少。为了更好地揭示BmCDAs对家蚕变态发育的作用，本研究采用生物信息学分析、蛋白表达纯化以及免疫荧光定位等方法对表皮中高量表达的BmCDA2进行了研究。结果发现，BmCDA2有两种mRNA拼接形式BmCDA2a和BmCDA2b，分别在幼虫眠期和化蛹期表皮高量表达，两个基因均有几丁质去乙酰化酶催化结构域(catalyticdomain)、几丁质结合结构域(chitinbinding domain)和低密度脂蛋白受体结构域(low density lipoprotein receptor domain);Western blotting结果显示，该蛋白在表皮存在，荧光免疫定位发现BmCDA2蛋白随着幼虫新表皮的生成而逐渐增多，推测BmCDA2可能参与了幼虫新表皮的形成。该结果丰富了家蚕CDAs的生物学功能信息，也为其他昆虫CDA的研究提供一些有价值的参考。

• 单位
  家蚕基因组生物学国家重点实验室; 西南大学