寒地稗草ISSR-PCR反应体系的正交优化

作者：张婉茹; 杨军丽; 吴丽群; 吴姝菊; 王晓萍^*

来源：分子植物育种, 2019, 17(02): 561-567.

DOI：10.13271/j.mpb.017.000561

• 寒地稗草
• ISSR
• 正交试验
• 反应体系

本研究以寒地稗草为实验材料,采用正交试验方法对影响ISSR-PCR反应体系的4个因素进行优化。研究结果表明,寒地稗草ISSR-PCR的最佳反应体系(20μL)为:10×PCR Buffer (含Mg2+) 2μL,dNTPs浓度为0.3 mmol/L,引物浓度为0.2μmol/L,Taq DNA聚合酶为0.75 U,模板DNA含量为20 ng。并确定了引物UBC888的最佳退火温度为51.9℃。利用该反应体系对15份寒地稗草的基因组进行扩增,结果证明优化后的ISSR反应体系稳定可靠,可为稗草种质资源的遗传多样性研究提供理论基础。

• 单位
  哈尔滨师范大学