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摘要
目的 筛选并验证CD44v9特异性多肽配体。方法 使用噬菌体展示12肽库筛选固相包被的CD44v9。测序发现待选序列，使用ELISA法进行验证，选择最佳序列合成探针。使用免疫荧光法验证C9-3多肽与CD44v过表达HEK-293细胞的结合，免疫组化法验证多肽探针与胃癌组织的特异性结合力。结果 噬菌体筛选过程中出现明确的富集效应，测序发现30个克隆包含9条序列，其中C9-3序列重复次数最高。ELISA显示9个待选序列中，C9-3序列具有最高的吸光度绝对值及选择力，因此选定为合成探针序列。C9-3探针结合于CD44v过表达HEK-293细胞，而不结合空质粒转染HEK-293细胞。C9-3探针与胃癌组织及癌旁组织结合的免疫组化评分之间存在统计学差异(t=3.953,P<0.01)。胃癌组织中，C9-3探针与CD44v9的组化评分存在线性正相关关系(r=0.823,P<0.01)。结论 本研究成功筛选出CD44v9配体多肽，可以通过CD44v9结合于细胞及胃癌组织，用于胃癌检测的探针。
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单位陕西科技大学; 西安交通大学第一附属医院
