含HSV-TK基因及IL-18基因复制缺陷型腺病毒载体的构建和鉴定

作者：徐春华; 刘越; 肖利民; 邓圣泽; 李东海

来源：中国医学创新, 2014, 11(36): 13-15.

• TK基因
• IL-18基因
• 腺病毒载体
• 构建
• 鉴定

目的:分别构建含TK及IL-18基因的重组腺病毒载体,并进行鉴定。方法:通过DNA重组技术,构建含有目的基因的复制缺陷型腺病毒Ad CMV-TK及Ad CMV-IL-18;将上述重组腺病毒液感染293细胞,提取DNA,进行PCR鉴定;将病毒液感染293细胞,扩增病毒,用OD260法测定病毒滴度。结果:经PCR鉴定,鉴定正确的腺病毒命名为Ad CMV-TK及Ad CMV-IL-18,测定病毒滴度Ad CMV-TK=1.28×109 PFU/m L;Ad CMV-IL-18=1.28×109 PFU/m L。结论:成功构建了含HSV-TK基因及IL-18基因重组腺病毒载体,为肿瘤的基因治疗提供了理论依据及实验数据。

• 单位
  南昌大学第一附属医院