摘要
目的探讨程序性死亡基因4(PDCD4)对死亡相关蛋白5(DAP5)的表达及对人大肠癌细胞系LOVO凋亡的影响。方法构建重组真核表达载体pFLAG/PDCD4,转染人大肠癌细胞LOVO,G418(500mg/L)筛选获得稳定表达PDCD4的细胞系。RT-PCR及Western blotting检测LOVO细胞中PDCD4的mRNA及蛋白表达,流式细胞仪检测LOVO细胞凋亡情况,Western blotting检测LOVO细胞DAP5表达的变化。结果成功建立稳定表达PDCD4的大肠癌细胞LOVO-pFLAG/PDCD4。转染PDCD4的LOVO-pFLAG/PDCD4组与空白对照LOVO组、转染空载质粒的LOVO-pFLAG组相比,PDCD4蛋白表达和mRNA水平明显升高(P<0.01);细胞凋亡率明显增加(P<0.01);同时伴有DAP5蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论 PDCD4能够诱导大肠癌细胞LOVO的凋亡,其机制可能与上调DAP5的表达有关。
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单位江西省分子医学重点实验室; 南昌大学第二附属医院; 江西省肿瘤医院