应用肽核酸钳制PCR技术检测胰腺癌K-ras基因突变

作者：林寒; 李兆申; 高军; 龚燕芳; 金晶

来源：第二军医大学学报, 2009, 30(07): 762-766.

• 胰腺肿瘤
• 肽核酸
• K-ras基因
• 实时定量PCR

目的:应用肽核酸钳制PCR技术检测胰腺癌K-ras基因突变,探讨其诊断价值。方法:结合特异性肽核酸(针对野生型序列)与实时定量PCR技术建立一步K-ras基因检测法,与传统限制性片段长度多态性PCR法检测结果进行比较,评价新方法的诊断价值。结果:肽核酸钳制PCR法可同时对胰腺癌标本中K-ras基因的第12、13密码子突变情况进行检测,操作简便;可在105倍的野生型K-ras基因背景下检测出突变,灵敏度为0.001%,可检测突变基因最低限为102拷贝;该方法可同时进行较大规模的样品检测,单次检测时间仅需1h。而传统方法可检测的突变基因最低限为103拷贝,检测灵敏度为0.01%;需花费约2d完成同样数量的样本检测。结论:肽核酸钳制实时定量PCR法较限制性片段长度多态性PCR法有明显优势,适用于胰腺癌大规模临床样本的K-ras基因突变检测,可作为胰腺癌筛查的有效手段。

• 单位
  长海医院消化内科; 中国人民解放军第二军医大学