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摘要
猫杯状病毒(FCV)是引起猫科动物呼吸道疾病的重要病原之一，常用患病猫的口鼻眼拭子进行病原学诊断或病毒分离，病原微生物的混合感染给病毒的分离纯化带来困难。为了快速获得纯化的FCV,本试验将临床检测FCV和猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)混合病料处理后进行蚀斑纯化及条件优化。结果显示：将细胞数约为7×105个/mL的F81细胞以每孔2 mL铺入6孔板中，待病毒吸附90 min后覆盖浓度为2%的第1层低熔点琼脂糖溶液，于37℃、5%CO2培养箱倒置培养48 h,然后加入含0.01%中性红的第2层低熔点琼脂糖溶液，于37℃、5%CO2培养箱培养，此条件所形成蚀斑的数量及大小均适合挑取。通过3次克隆纯化，挑取蚀斑进行了RT-PCR检测，成功从FCV和FHV-1的混合病毒中分离纯化到1株FCV。本试验首次建立的FCV蚀斑克隆方法，有助于FCV以及其他病毒的分离纯化，并为病毒的生物学特性试验提供科学依据。
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