SAHA联合顺铂对食管癌ECA-109细胞系抑制协同作用及机制研究

作者：薛晓婕; 尹建军^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2019, 26(18): 1335-1341.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2019.18.04

• 辛二酰苯胺异羟肟酸
• 顺铂
• HDAC3
• TMS1/ASC
• Caspase-3
• 食管鳞状细胞癌

目的组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACi)辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)作为一种新型抗肿瘤药物在抗肿瘤中发挥重要作用,且在食管癌的研究较少。本研究探讨SAHA联合顺铂(cisplatin,DDP)对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)ECA-109细胞的影响及其作用机制。方法实验分为对照组(未做任何处理)、SAHA组、Cisplatin组和SAHA+Cisplatin组4组,采用噻唑蓝(MTT)法检测SAHA (2、4、8和16μmol/L)、DDP (50、100、200和400ng/mL)和SAHA(2、4和8μmol/L)+DDP(100、400ng/mL)对ECA-109细胞增殖的影响。流式细胞仪检测药物诱导食管癌细胞凋亡情况,激光共聚焦扫描显微镜观察细胞形态的改变。蛋白质印迹法检测SAHA、DDP和SAHA+DDP对ECA-109细胞中HDAC3、TMS1/ASC和Caspase-3蛋白表达水平的影响。结果 MTT实验结果表明,SAHA和DDP对ECA-109细胞均具有生长抑制作用,各组药物在不同浓度和不同时间对Eca-109细胞的抑制率,差异有统计学意义,均P<0.001。流式细胞术检测显示,Eca-109细胞经过SAHA+DDP作用48h后细胞凋亡率为(75.4±5.38)%,高于SAHA组(49.21±2.53)%、DDP组(44.7±3.04)%和对照组(2.5±0.22)%,结果显示,SAHA、DDP和二者联合的治疗效应差异有统计学意义,F值分别为59.5、43.9和245.4,均P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,Eca-109细胞在空白对照组、SAHA组、DDP组和SAHA+DDP组作用48h后HDAC3表达水平分别为0.85±0.12、0.52±0.06、0.57±0.05和0.28±0.07,TMS1/ASC表达水平分别为0.42±0.11、0.73±0.13、0.64±0.05和1.3±0.25,Caspase-3表达水平分别为0.27±0.06、0.83±0.09、0.81±0.08和1.2±0.17。结果显示,SAHA、DDP和二者联合的治疗效应差异有统计学意义,F值分别为25.84、17.95和87.44,均P<0.001。结论 SAHA和DDP具有抑制ECA-109细胞增殖并协同诱导细胞凋亡,这一作用机制可能与Caspase激活介导线粒体凋亡通路有关。

• 单位
  黄石市中心医院; 湖北理工学院