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摘要
目的：利用埃博拉假病毒（EBOV）报告系统，体外评价埃博拉病毒突变体对4种细胞系的相对感染力及3株单抗对突变体的中和能力。方法：构建表达埃博拉假病毒及其突变体GP蛋白的重组质粒GP-pcDNA3.1，与含有萤火虫荧光素酶报告基因的HIV骨架载体pSG3.ΔEnv.CMV.Fluc共转染HEK293T细胞获得假病毒上清。利用Western blot法及HIV p24 ELISA抗原定量试剂盒对假病毒进行鉴定及定量，采用等量的假病毒感染HEK293T、Huh7、A549及THP-1细胞，36 h后，裂解细胞测荧光素酶活性（RLU），计算突变体与母本的相对感染力。将mAb114、ADI-15946、rEBOV-520与EBOV及其突变体假病毒预孵育1 h，将假病毒上清和抗体混合液感染HEK293T细胞，36 h后测RLU值，计算抑制率。结果：相对于母本，所有突变体感染细胞的能力均有不同程度增强。单抗mAb114、ADI-15946能有效中和母本及14株突变体，rEBOV-520对N107D-P330S-G480D中和作用减弱。结论：体外实验证明14株突变体入侵靶细胞能力增强。3株中和抗体对突变体中和作用良好，为应对EBOV突变引发的疫情提供了一定参考。
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单位内蒙古医科大学; 药物研究所; 中国食品药品检定研究院
