条斑紫菜R-藻红蛋白荧光探针制备条件优化

作者：周铭; 蔡春尔; 柳俊秀; 吴维宁; 何培民

来源：生物工程学报, 2008, (01): 153-158.

DOI：10.13345/j.cjb.2008.01.019

• R-藻红蛋白
• 单克隆抗体
• 交联
• 荧光探针
• 制备
• 条件优化 R-phycoerythrin
• IgG conjugation
• fluorescence probes
• preparation
• optimization

通过化学方法使条斑紫菜R-藻红蛋白与抗体进行交联以制备荧光探针,并对制备条件进行优化。首先采用异双功能试剂SPDP(N-琥珀酰亚氨基-3-2-吡啶基二硫丙酸醇)和DTT(二硫苏糖醇)分别使R-PE(R-藻红蛋白)衍生化、IgG(单克隆抗体)巯基化,其次测定了SPDP与R-PE不同摩尔比对R-PE衍生化的影响、DTT与IgG不同摩尔比对IgG巯基化的影响,结果表明:SPDP与R-PE的最佳摩尔比为40:1,DTT与IgG的最佳摩尔比为500:1。在此基础上,建立了R-PE与IgG交联的制备技术,并应用全波长扫描吸收光谱、电泳分析和荧光显微镜观察等监测和分析技术。证实了藻红蛋白与抗体已成功交联形成...

• 单位
  上海海洋大学