新生SD大鼠心肌细胞原代培养方法的比较

作者：王凤阁; 孙思琪; 韩月; 孔钰琳; 张绪东^*

来源：牡丹江医学院学报, 2022, 43(01): 1-30.

DOI：10.13799/j.cnki.mdjyxyxb.2022.01.001

• 新生大鼠
• 心肌细胞
• 原代培养
• 胶原酶

目的建立并比较新生SD大鼠心肌细胞的原代培养方法。方法采用胰酶法和胰酶+Ⅱ型胶原酶法分别消化心肌组织,两次90 min差速贴壁纯化心肌细胞,倒置显微镜下观察细胞形态变化,分别采用台盼蓝和免疫荧光染色评估心肌细胞的存活率和纯度。结果与胰酶法相比,胰酶+Ⅱ型胶原酶法可以获得形态良好且结构完整的心肌细胞;胰酶+Ⅱ型胶原酶法分离心肌细胞的获得率[(1.21±0.03)×106 vs(0.65±0.02)×106,P<0.01]和心肌细胞存活率[(93.37±0.40)%vs (86.40±0.36)%,P<0.01]明显高于胰酶法;两种方法获得的心肌细胞纯度均达到95%以上,但是胰酶+Ⅱ型胶原酶法获得心肌细胞所耗时间明显多于胰酶法[(14.00±0.40)h vs (4.59±0.10)h,P<0.01]。结论胰酶+Ⅱ型胶原酶法比胰酶法分离心肌细胞耗时长,但胰酶+Ⅱ型胶原酶法分离的心肌细胞获得率高、存活率高、细胞结构完整,是一种简单易行且高效的培养方法。

• 单位
  牡丹江医学院