5-ALA-PDT联合放疗对常氧与乏氧人卵巢癌SKOV3细胞的协同杀伤作用机制

作者：曹金发; 刘宏; 熊康萍; 沈晶晶; 季可非; 郭敏

来源：中国医院药学杂志, 2016, 36(17): 1482-1486.

DOI：10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2016.17.12

• 放疗
• 光动力疗法
• 5-氨基酮戊酸
• 乏氧
• ROS
• 凋亡

目的:探讨在常氧与乏氧下5-氨基酮戊酸(5-ALA)介导的光动力疗法(PDT)(5-ALA-PDT)联合放疗对人卵巢癌SKOV3细胞的协同杀伤作用机制。方法:实验分为常氧组与乏氧组,两组再各设正常对照组(N)、单纯药物组(0.3 mmol·L-1)、放射加药组(0.3 mmol·L-1+6 Gy)、光动力组(0.3 mmol·L-1+0.5 J·cm-2)及联合组(6 Gy+0.3 mmol·L-1-0.5 J·cm-2),采用荧光显微镜观察5-ALA转化为原卟啉IX的荧光强度,倒置显微镜结合台盼蓝单染法检测细胞膜破损率,荧光显微镜结合Hoechst 33342单染法检测细胞凋亡,流式细胞仪结合试剂盒检测ROS含量。结果:4 h后细胞膜附近明显出现红色荧光,常氧下的荧光强度显著强于乏氧。24 h或48 h后,联合组细胞膜破损率常氧高于乏氧(P<0.01),随着时间的延长细胞膜破裂增多(P<0.01);同时间点同组内联合组细胞膜破损率比单纯放射加药组、光动力组都要高(P<0.01)。24 h或48h后,联合组细胞凋亡率24 h常氧低于乏氧(P<0.01),48 h不显著(P>0.05),随着时间的延长凋亡率不断降低(P<0.01);同时间点同组内联合组24 h细胞凋亡率比单纯放射加药组、光动力组都要高,而48 h却都要低(P<0.05)。0h、12 h或24 h后,联合组ROS含量常氧低于乏氧(P<0.01),随着时间的延长ROS含量先升高后降低(P<0.01),12 h含量最高;同时间点同组内联合组ROS含量都比单纯放射加药组、光动力组都要高(P<0.05)。结论:常氧下5-ALA-PDT与放疗联用表现出协同作用,可能与产生的ROS导致细胞膜破损造成细胞大量坏死有关;而乏氧下表现出协同作用可能与ROS导致细胞大量凋亡有密切联系。

• 单位
  中国人民解放军第117医院; 中国人民解放军广州军区武汉总医院