铅诱导离体神经干细胞氧化应激和铜蓄积及MitoQ的保护作用

作者：姚金余; 王涛; 邹远康; 赵子瑜; 官瑞丽; 郑刚^*

来源：空军军医大学学报, 2023, 44(03): 216-221.

DOI：10.13276/j.issn.2097-1656.2023.03.005

• 铅暴露
• 铜
• 神经干细胞
• 氧化应激

目的 研究铅离子(Pb2+)暴露对神经干细胞(NSC)氧化应激和诱导铜蓄积的作用，探讨MitoQ的抗氧化保护作用。方法 C17.2神经干细胞用2.5、5、10、20μmol/L Pb(Ac)2 分别暴露24 h和48 h,建立低剂量Pb2+暴露体外模型，并设置对照组[0μmol/L Pb(Ac)2]。MTT法检测细胞活力；活性氧荧光探针(DCFH-DA)检测细胞活性氧自由基(ROS)含量；TBA法测定细胞丙二醛(MDA)含量；黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶1(SOD1)的活性；原子吸收分光光度法检测细胞铜吸收；Western blotting检测细胞内铜转运体CTR1、ATP7A和ATP7B蛋白水平。结果 与对照组相比，2.5～20μmol/L Pb2+暴露24 h或48 h后，对细胞活力产生显著的抑制作用，而细胞ROS和MDA水平、SOD1活性均显著高于对照组(P<0.01,P<0.05);不同浓度Pb2+暴露后细胞内铜水平显著增高(P<0.05),CTR1蛋白水平增高(P<0.05),而ATP7A、ATP7B蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05)。使用抗氧化剂MitoQ处理细胞，可以逆转Pb2+暴露所诱导的细胞的ROS、MDA和SOD1水平变化(P<0.01),且伴随细胞活力的显著回升。结论 Pb2+暴露可能通过诱导C17.2 NSC铜蓄积，促进氧化应激和细胞活力降低；抗氧化剂MitoQ可以抑制Pb2+引起的氧化应激，起到显著的细胞保护作用。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 陕西中医药大学