沉默信息调节因子2相关酶3调控自噬减轻H2O2诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡

作者：廖贞亮; 冯帮海; 任颖聪; 刘君亚; 郑杰; 梅鸿; 覃松^*

来源：实用医学杂志, 2023, 39(11): 1389-1395.

• 沉默信息调节因子2相关酶3
• 自噬
• 凋亡
• Ⅱ型肺泡上皮细胞

目的 探讨沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)调控自噬在H2O2诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用。方法 使用对数生长期的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株(MLE-12)，利用0.5 mmol/L H2O2建立MLE-12细胞凋亡模型，分为：正常对照组、H2O2损伤组、H2O2+SIRT3组、H2O2+SIRT3沉默组。CCK8法检测各组细胞增殖活力；SOD、MDA及T-AOC试剂盒检测SOD、MDA及T-AOC水平；构建mRFP-GFP-LC3自噬双标体系，激光共聚焦显微镜观察自噬水平；激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化及ROS水平；蛋白免疫印迹实验检测SIRT3、Bcl2、Bax及LC3B表达水平。结果 与正常对照组比较，H2O2损伤组、H2O2+SIRT3组和H2O2+SIRT3沉默组MDA、ROS水平及自噬小体、自噬溶酶体点数升高(P <0.05)，细胞活力、SOD、T-AOC水平和线粒体膜电位降低(P <0.05),SIRT3及Bcl2蛋白表达降低(P <0.05),Bax及LC2Ⅱ蛋白表达升高(P <0.05)，以H2O2+SIRT3沉默组最为显著；与H2O2损伤组比较，MDA、ROS水平及自噬小体、自噬溶酶体点数下降(P <0.05)，细胞活力、SOD、T-AOC水平和线粒体膜电位升高(P <0.05),SIRT3及Bcl2蛋白表达升高(P <0.05),Bax及LC2Ⅱ蛋白表达降低(P <0.05)。结论 SIRT3可以通过抑制自噬、氧化应激及凋亡减轻H2O2诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤。

• 单位
  遵义医科大学