微小RNA-144-3p靶向调控TPD52表达及对喉癌细胞凋亡和侵袭的影响

作者：杨森; 陈红; 夏兵华

来源：临床肿瘤学杂志, 2018, 23(11): 978-982.

• 喉癌
• 微小RNA-144-3p(miR-144-3p)
• 肿瘤蛋白D52(TPD52)
• 增殖
• 凋亡

目的探讨微小RNA-144-3p(miR-144-3p)对喉癌细胞凋亡、侵袭的影响和肿瘤蛋白D52(TPD52)的靶向调控作用。方法采用荧光实时定量PCR(QPCR)法检测23对手术切除的喉癌组织和癌旁组织及人鼻咽永生化上皮细胞NP69和喉癌细胞株(Hep2、TU212和TU686)的miR-144-3p水平。选取miR-144-3p水平最低的喉癌细胞并向其转染miR-144-3p模拟物(过表达组)或阴性对照(对照组),转染48 h后采用QPCR检测两组的miR-144-3p和TPD52 m RNA水平,采用MTT法、流式细胞术和Transwell小室实验检测增殖率、凋亡率和穿膜细胞数;采用双荧光素酶报告实验评价miR-144-3p对TPD52的靶向调控作用。结果 QPCR检测结果显示,喉癌组织中miR-144-3p的水平为0. 241±0. 156,低于癌旁组织的1. 003±0. 229(P<0. 05);喉癌细胞Hep2、TU212和TU686的miR-144-3p水平依次为0. 123±0. 027、0. 356±0. 069和0. 541±0. 087,均低于NP69细胞(P<0. 05),选取表达水平最低的Hep2细胞用于后续实验。转染48 h,过表达组miR-144-3p的水平为3. 266±0. 820,高于对照组的1. 051±0. 144(P<0. 05)。过表达组转染24、48、72 h的细胞增殖率均低于对照组(P<0. 05)。转染48 h过表达组的细胞凋亡率为(16. 980±1. 983)%,高于对照组的(6. 732±0. 943)%,差异有统计学意义(P<0. 05)。过表达组的穿膜细胞数为(62. 7±8. 0)个,低于对照组的(87. 7±8. 9)个,差异有统计学意义(P<0. 05)。双荧光素酶活性检测结果显示,miR-144-3p可抑制野生型TPD52 3’UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型TPD52 3’UTR的荧光素酶活性无影响。结论miR-144-3p在喉癌组织和喉癌细胞株中均低表达。miR-144-3p可能通过抑制TPD52表达来抑制喉癌细胞的增殖、侵袭并诱导凋亡。

• 单位
  苏州市吴江区第一人民医院