羧胺三唑通过抑制NFAT2核转运降低小鼠CD8+T细胞中程序性死亡受体1的表达

作者：许梦姣; 高洪婷; 石婧; 鞠瑞; 杨黎星; 李建恒^*; 郭磊^*

来源：基础医学与临床, 2020, 40(05): 627-631.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2020.05.006

• 羧胺三唑
• +T细胞" name="keyword">CD8+T细胞
• 2+" name="keyword">Ca2+
• 活化T细胞核因子2
• PD-1

目的研究羧胺三唑(CAI)对CD8+T细胞的作用,并探索其增强活化的T细胞杀伤作用的关键机制。方法用免疫磁珠分选出小鼠CD8+T细胞,分为对照组、CAI组、ZK756326(Ca2+激活剂)组以及CAI+ZK756326组。流式细胞计量术检测细胞内游离钙离子水平;酶联免疫吸附法检测细胞内钙调磷酸酶(CaN)的表达;免疫荧光染色检测细胞活化T细胞核因子2(NFAT2)核转运;染色质免疫共沉淀-qPCR检测细胞中NFAT2调控程序性死亡受体1(PD-1)表达。分离小鼠脾脏细胞毒性T淋巴细胞(CTLs),流式细胞计量术检测其中CD8+T细胞PD-1的表达。结果 CAI组显著降低CD8+T细胞内Ca2+浓度(P<0.001),CAI+ZK756326组胞内Ca2+浓度有所升高(P<0.01);CAI显著降低CD8+T细胞中钙调磷酸酶的含量(P<0.001);CAI可显著抑制NFAT2核转运(P<0.001),并使NFAT2依赖的PD-1转录进程显著降低(P<0.001);CAI使小鼠脾脏CTLs细胞中PD-1+CD8+T细胞比例显著减少(P<0.001)。结论 CAI通过抑制CD8+T细胞内钙离子水平以及钙调磷酸酶的表达抑制NFAT2核转运,从而降低CD8+T细胞PD-1的表达,进一步产生免疫治疗干预作用。

• 单位
  中国医学科学院基础医学研究所; 河北大学; 北京协和医学院