对比剂通过内质网应激诱导人肾小管上皮细胞凋亡

作者：孙丽娜; 黄敏; 张丹凤; 苏津自

来源：中华高血压杂志, 2017, 25(12): 1169-1174.

DOI：10.16439/j.cnki.1673-7245.2017.12.026

• 内质网应激
• 对比剂
• 细胞凋亡
• 人肾小管上皮细胞

目的探讨内质网应激在对比剂诱导人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡中的作用。方法在缺血、缺氧(0.2%胎牛血清,5%CO2-95%N2饱合混合气体)环境下,以HKC为研究对象,将HKC细胞株随机分为3组:空白组、对比剂组(加入120g I/L碘普罗胺预处理2h)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)组(加入10mmol/L NAC预处理2h,再加120g I/L碘普罗胺处理2h)。细胞增殖试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测细胞中半胱氨酸蛋白酶-12(caspase-12)、葡萄糖调节蛋白-78(GRP78)和CAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的mRNA表达水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中caspase-12、GRP78和CHOP的蛋白表达水平。结果对比剂可呈时间依赖性抑制HKC活性,与0h相比,1hHKC活性显著降低(0.351±0.066比0.447±0.087,P<0.05);流式细胞术结果示对比剂可促进缺血缺氧HKC凋亡(P<0.05);real-time PCR结果示,对比剂组和NAC组GRP78和CHOP的mRNA水平明显高于空白组(P<0.05),对比剂组caspase-12的mRNA水平明显高于空白组和NAC组(P<0.05);Western blot结果示,对比剂明显增加了caspase-12、GRP78和CHOP的蛋白表达,而NAC明显降低了caspase-12的表达,但不能明显降低对比剂诱导的GRP78和CHOP高表达(P<0.05)。结论在缺血缺氧条件下,对比剂诱导HKC活性下降、凋亡,此作用可能与细胞内氧化应激及内质网应激相关。

• 单位
  福建医科大学附属第一医院; 福建省高血压研究所