摘要
目的:研究血竭石油醚提取物(SDPEF)对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞增殖、凋亡、体外迁移能力及自噬的影响,并阐明其分子作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测SDPEF(0,20,40,60,80 mg·L-1)作用24,48,72 h时,对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞体外增殖的影响。借助Hoechst染色实验观察不同浓度的SDPEF作用48 h后对HGC-27和MGC-803细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度SDPEF作用48 h,对HGC-27和MGC-803细胞凋亡率的影响。采用细胞划痕实验观察不同浓度SDPEF在不同作用时间点对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞体外迁移能力的影响。借助吖啶橙染色实验检测不同浓度SDPEF对HGC-27和MGC-803细胞自噬的影响。利用蛋白免疫印迹法检测SDPEF作用人胃癌HGC-27和MGC-803细胞48 h后对信号通路相关蛋白表达水平的调控作用。结果:与空白组比较,SDPEF(30 mg·L-1)组人胃癌HGC-27和MGC-803细胞的增殖和体外迁移能力明显降低(P<0.05),且具有浓度与时间依赖性;SDPEF(60 mg·L-1)还能够诱导人胃癌HGC-27和MGC-803细胞凋亡(P<0.01)和自噬的发生。与空白组比较,SDPEF(60 mg·L-1)能够下调磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)表达(P<0.05,P<0.01),且能够下调磷酸化信号传导与转录激活因子3(p-STAT3)蛋白表达水平(P<0.01),提示SDPEF可能是通过抑制mTOR/STAT3信号通路来抑制人胃癌HGC-27和MGC-803细胞的增殖、迁移并诱导其发生凋亡和自噬。结论:mTOR/STAT3信号通路下调可能参与了SDPEF的抗胃癌作用。该研究能够为血竭抗肿瘤作用研究提供一定的参考。
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单位中药现代研究中心; 北京中医药大学