鞘内注射siRNA-P300抑制CaMK Ⅱ磷酸化缓解佐剂性关节炎大鼠疼痛与炎症的作用机制

作者：谈俊; 高巍巍; 滕志鹏; 王广; 代震宇; 李炜^*

来源：河北医药, 2023, 45(15): 2271-2276.

• P300
• CaMK Ⅱ
• 佐剂性关节炎
• 疼痛
• 炎症

目的 研究敲低转录辅因子P300对佐剂性关节炎大鼠的痛觉和炎症的影响并探讨钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)介导的机制。方法 60只SPF级别健康成年SD大鼠，随机分为A、B、C、D、E、F共6组(n=10)。A组：对照组；B组：关节模型组；C组：siRNA-P300的阴性对照(siRNA-NC)+关节炎模型组；D组：siRNA-P300+关节炎模型组；E组：siRNA-P300+二甲基亚砜(DMSO)+关节炎模型组；F组：siRNA-P300+油酸+关节炎模型组。各组大鼠造模前1 d及造模后1 d、7 d、14 d的5个时间点分别使用Von Frey纤维丝刺激针以及热辐射痛检测仪分别检测大鼠左后足的机械痛阈值(MWT)和热缩足潜伏期(PWTL),使用电子千分卡尺测左后足跖厚度；于造模后14 d处死动物取脊髓L4～L5节段，采用免疫组织化学法检测脊髓P物质(SP)、c-fos、p-CaMKⅡ的表达水平；蛋白免疫印迹检测CaMKⅡ的磷酸化(p-CaMKⅡ)水平。ELISA法检测血清TNF-α、L-1β、IL-6的水平。结果 与A组比较，B组造模后1 d、7 d、14 d的MWT和PWTL均下调，差异均有统计学意义(P<0.05),B组左后足跖厚度增加且TNF-α、L-1β、IL-6上调，差异均有统计学意义(P<0.05),脊髓的SP、c-fos、p-CaMKⅡ的表达水平均上调，差异均有统计学意义(P<0.05)。与C组比较，D组在造模后1 d、7 d、14 d的MWT和PWTL均上调，差异均有统计学意义(P<0.05),D组的足跖厚度减少且TNF-α、IL-1β、IL-6下调，差异均有统计学意义(P<0.05),脊髓的SP、c-fos、p-CaMKⅡ阳性率和表达水平均下调，差异均有统计学意义(P<0.05)。与E组比较，F组在造模后1 d、7 d、14 d的MWT和PWTL均下调，差异均有统计学意义(P<0.05),F组TNF-α、L-1β、IL-6有小幅度上调，差异均有统计学意义(P<0.05),脊髓的SP、c-fos、p-CaMKⅡ的表达水平均上调，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 鞘内注射siRNA-P300可通过抑制CaMKⅡ磷酸化缓解佐剂性关节炎大鼠疼痛与炎症作用。

• 单位
  重庆市中医院