重组大肠杆菌发酵生产谷氨酰胺转胺酶的过程优化

作者：马建龙; 刘松; 陈康康; 张东旭; 张娟; 堵国成; 陈坚

来源：工业微生物, 2013, 43(03): 55-60.

• 谷氨酰胺转胺酶
• 大肠杆菌
• 补料分批发酵

以分泌吸水链霉菌(Streptomyces hyroscopicus)谷氨酰胺转胺酶酶原(pro-TGase)的重组大肠杆菌(Escherichia coli(pBB1-1010))为出发菌株,研究了在3 L发酵罐中补料分批发酵对重组pro-TGase发酵的影响。重组pro-TGase经活化蛋白酶(dispase)处理得到活性酶(TGase)。在甘油初始浓度为8 g/L的TB培养基中,脉冲流加甘油使菌体浓度提高至OD600=43,胞外TGase产量和生产强度分别达到12.71 U/mL和0.18 U/mL/h。采用大肠杆菌合成发酵培养基进行补料分批发酵,诱导时添加150 mmol/L的甘氨酸和20 mmol/L CaCl2可使TGase产量和生产强度分别提高至15.68 U/mL和0.37 U/mL/h;同时,pro-TGase在重组菌胞内大量累积,使TGase总产量达到30.35U/mL,具有一定的工业应用前景。

• 单位
  工业生物技术教育部重点实验室; 食品科学与技术国家重点实验室; 江南大学