Elafin真核表达载体的构建及其对气道粘液高分泌的调节

作者：余红梅; 李琪; 尤列·皮尔曼; 维克多·科罗索夫; 周向东

来源：中国免疫学杂志, 2011, (05): 440-445.

DOI：10.3969/j.issn.1000-484X.2011.05.014

• Elafin
• 粘蛋白
• 脂多糖
• 核转录因子-κB Elafin
• Mucin
• Lipopolysaccharide
• Nuclear factor κB

目的:构建天然内生多肽Elafin真核表达载体,探讨其对气道粘液高分泌的影响。方法:抽提Elafin行RT-PCR获取Elafin cDNA,双酶切后将片段装载到pMD18-T载体上。以pMD18-T-Elafin为模板行PCR反应,产物胶回收并双酶切后定向克隆至pEGFP-N1上,转化,筛选,双酶切鉴定重组质粒。将pEGFP-N1-Elafin转染正常人支气管上皮细胞HBE16,给予脂多糖(LPS)刺激,Western blot检测细胞内Elafin蛋白的相对含量,RT-PCR检测各组Elafin mRNA和粘蛋白(MUC)5AC mRNA表达水平,荧光素酶报告基因检测系统测定核转录因子-κ...

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院