LRTN4RL1-AS通过miR-27a-3p靶向PPARγ调节奶牛乳腺细胞乳脂合成

作者：贾鸿儒; 杨超群; 王萌; 吴章情; 昝林森; 杨武才^*

来源：畜牧兽医学报, 2023, 54(04): 1465-1477.

• 乳脂肪
• lncRNA
• PPARγ
• miR-27a-3p

旨在探究lncRNA-LRTN4RL1-AS/miR-27a-3p/PPARγ轴在奶牛乳脂合成中的作用及其调控机制。本研究以奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, BMECs)为试验对象，对处理组与对照组进行3个生物学重复，通过实时荧光定量(real time quantitative PCR, RT-qPCR)、WB(Western blot)、油红O染色和甘油三酯检测、双荧光素酶报告等技术检测lncRNA-LRTN4RL1-AS对BMECs中甘油三酯积累及脂质合成相关基因表达量的影响，验证LRTN4RL1-AS-miR-27a-3p-PPARγ存在内源竞争RNA(competing endogenous RNAs, ceRNA)的靶向关系。结果表明，LRTN4RL1-AS主要在细胞质中表达，干扰LRTN4RL1-AS后显著抑制了BMECs的脂滴形成和甘油三酯积累(P<0.05),显著下调脂质合成相关基因CEBPα(P<0.01)、CEBPβ(P<0.01)和PPARγ(P<0.05)表达，且显著上调脂质分解基因HSL表达(P<0.05);双荧光素酶报告试验发现，转染mimics-miR-27a-3p, LRTN4RL1-AS突变型组荧光素酶活性显著高于LRTN4RL1-AS野生型组(P<0.01),证实LRTN4RL1-AS与miR-27a-3p之间存在靶向结合关系；共转染试验发现，inhibitor-miR-27a-3p逆转了干扰LRTN4RL1-AS对乳脂合成的抑制作用(P<0.05),同时降低了si-LRTN4RL1-AS对PPARγ基因的表达抑制。结果显示，LRTN4RL1-AS通过竞争性结合miR-27a-3p调控PPARγ表达来调节BMECs乳脂合成。

• 单位
  西北农林科技大学; 国家肉牛改良中心; 动物科技学院