乙型肝炎病毒对HepG2细胞表达TLR3的影响

作者：李永伟; 朱明芬; 郭云蔚; 陈伟; 凌小强; 李刚

来源：广东医学, 2007, 28(12): 1905-1907.

DOI：10.3969/j.issn.1001-9448.2007.12.006

• 乙型肝炎病毒
• Toll样受体3
• HepG2细胞株

目的乙肝病毒全基因组体外扩增,构建质粒并测序,酶切后瞬时转染HepG2细胞,观察对HBV抗原分泌,病原识别受体Toll样受体3(TLR3)的表达及细胞增殖的影响。方法长片段PCR法扩增HBVDNA全长,构建pBlueScript-HBV质粒并转化宿主菌,摇菌后提取质粒经测序,用SapⅠ酶切,获得HBV3.2kb基因组,采用脂质体瞬时转染HepG2细胞株,IMX检测HBV所分泌抗原,台盼蓝计数检测细胞增殖活性,直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测表达TLR3的阳性细胞百分率,并与空白对照组对比。结果HBsAg和HBeAg的分泌随着转染HBVDNA量的增加而升高,除4μg和6μg组两组间比较的表面抗原外,差异均有显著性(P<0.05)。TLR3在转染后均有上调,除4μg与6μg组间比较外,各组间差异有显著性(P<0.05)。台盼蓝拒染法示细胞存活随转染剂量的升高而减少(P<0.05),但4μg和6μg两组间比较差异无显著意义(P>0.05)。而各转染剂量组HBsAg和e抗原的分泌及细胞的存活数均与TLR3的表达呈显著正相关(P<0.01)。结论本研究初步表明乙肝病毒可能直接引起HepG2细胞TLR3的上调,而且上调可能启动了细胞的凋亡或坏死机制,成为HBV损伤细胞的非免疫细胞介导机制。

• 单位
  中山大学附属第三医院