CKLF1-C19多肽影响口腔黏膜下纤维性变中MFB活化及对SFRP表达的影响

作者：李艳莉; 徐仰龙; 邓金勇; 何升腾^*; 董方

来源：西部医学, 2023, 35(02): 195-202.

DOI：10.3969/j.issn.1672-3511.2023.02.008

• 口腔黏膜下纤维性变
• 肌成纤维细胞
• 人趋化素样因子C19多肽
• 分泌型卷曲相关蛋白

目的 探讨人趋化素样因子(CKLF1)C19多肽对口腔黏膜下纤维性变(OSF)中肌成纤维细胞(MFB)活化的作用以及对分泌型卷曲相关蛋白(sFRP)表达的影响。方法 选取2020年1月～2021年1月在三亚中心医院口腔科门诊就诊并确诊为OSF的患者8例，并选择同期体检的健康志愿者8例，通过组织块培养法分别从健康志愿者和OSF患者颊粘膜组织分离成纤维细胞(FB)和MFB,免疫荧光染色检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维状肌动蛋白(F-actin)表达，以鉴定MFB;将MFB随机分为对照组、0.001 mg/L C19组、0.01 mg/L C19组、0.1 mg/L C19组，各浓度C19处理组分别使用含0.001、0.01、0.1 mg/LCKLF1-C19多肽培养液培养细胞48 h,对照组细胞正常培养，CCK-8法测定各时间点细胞增殖活性，收集上清后测定羟脯氨酸的含量，胶原凝胶收缩实验检测细胞收缩活性，Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力，实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验测定细胞中sFRP1、sFRP2、sFRP5的mRNA与蛋白表达水平。结果 分离的FB与MFB大多呈长梭形，MFB胞体较大、数目较多，且α-SMA呈阳性表达。与对照组比较，经过0.001、0.01、0.1 mg/L的CKLF1-C19多肽处理的MFB,在培养48 h和72 h后细胞增殖活性显著降低(P<0.05),上清中羟脯氨酸的含量减少(P<0.05),胶原凝胶收缩面积比率显著增加(P<0.05),迁移细胞数目与侵袭细胞数目均显著减少(P<0.05),细胞内sFRP1和sFRP2的mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05),而sFRP5 mRNA和蛋白表达水平变化均无统计学意义(P>0.05)。结论 CKLF1-C19多肽能够抑制口腔黏膜下纤维性变组织中肌成纤维细胞的增殖、迁移与侵袭，降低细胞的活化水平，并调控sFRP1和sFRP2的表达。

• 单位
  三亚市人民医院; 遵义医科大学