miR-20a-5p对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y、SK-N-BE裸鼠移植瘤的影响

作者：李万富^*; 刘辉; 古力米热木·买买提江; 阿依古再丽·麦麦江; 阿尔新·哈布丁; 樊珈榕; 鹿洪亭

来源：中华小儿外科杂志, 2023, 44(12).

• 神经母细胞瘤
• 裸鼠
• 核因子κB

目的探讨miR-20a-5p对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y、SK-N-BE裸鼠移植瘤生长的影响及可能的调控机制。方法将SK-N-BE细胞系和SH-SY5Y细胞系分别分为原细胞系组、阴性对照组及miR-20a-5p过表达组, 即SK-N-BE组、SK-N-BE-miR-20a-5p-NC组、SK-N-BE-miR-20a-5p过表达组;SH-SY5Y组、SH-SY5Y-miR-20a-5p-NC组、SH-SY5Y-miR-20a-5p过表达组。将24只BALB/c裸鼠随机分为6组, 将两种细胞系的不同分组分别接种在裸鼠右侧腋窝皮下。以SK-N-BE组、SH-SY5Y组瘤块尺寸达到100 mm3时判定成瘤成功, 待瘤块平均直径不超过15 mm时取血、处死裸鼠取其瘤体测量体积和质量。RT-qPCR检测各组中miR-20a-5p miRNA含量及NFKBIB、NF-κB mRNA含量。结果 SK-N-BE、SH-SY5Y两个细胞系中, miR-20a-5p过表达组分别与原细胞系组相比, 瘤体体积和质量均明显增加, 差异有统计学意义(P<0.05);阴性对照组与原细胞系组相比, 瘤体体积和质量差异无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR结果显示两个细胞系中, miR-20a-5p过表达组分别与原细胞系组相比, miR-20a-5p miRNA、NF-κB mRNA表达含量明显升高, NFKBIB mRNA表达含量降低, 差异均有统计学意义(P<0.05);阴性对照组与原细胞系组相比, miR-20a-5p miRNA、NFKBIB、NF-κB mRNA含量差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot结果显示两个细胞系中, miR-20a-5p过表达组分别与原细胞系组相比, NF-κB蛋白的相对表达量明显升高, NFKBIB蛋白的相对表达量降低, 差异均有统计学意义(P<0.05);阴性对照组与原细胞系组相比, NF-κB、NFKBIB蛋白的相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-20a-5p可能通过抑制NFKBIB的表达来激活NF-κB通路从而促进SK-N-BE、SH-SY5Y细胞在裸鼠体内的生长, 可作为治疗神经母细胞瘤潜在干预靶点。

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院; 青岛大学