摘要
为了克隆和分析甘肃马鹿缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因编码区(CDS)保守区域序列,并检测其不同生长时期的差异表达,探索HIF-1α基因参与鹿茸快速生长的潜在分子机制,试验分别在花盘脱落后30天(新茸初生期)、60天(快速生长期)和90天(骨化期)时采集甘肃马鹿鹿茸,分离其顶端软骨组织,对HIF-1α基因进行克隆并对测序结果进行生物信息学分析,应用实时荧光定量PCR技术检测HIF-1α基因在不同生长时期的甘肃马鹿鹿茸软骨组织中的表达情况。结果表明:克隆所得甘肃马鹿鹿茸HIF-1α基因CDS保守区域序列长度为1 799 bp,编码599个氨基酸,与牛科动物亲缘关系较近,在物种间保守性较高。HIF-1α基因在60天甘肃马鹿鹿茸软骨组织中表达最高,显著高于30天和90天(P<0.05)。预测的miRNAs中,miR-135a的表达与HIF-1α表达趋势相反, miR-18b与HIF-1α表达趋势相同,其他3个miRNAs在生长30天和90天鹿茸软骨中的表达量与60天相比差异不显著(P>0.05)。说明试验成功克隆了甘肃马鹿HIF-1α基因CDS保守区域序列,该基因可能在miR-135a的调控下参与促进快速生长期鹿茸软骨组织的生长。
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