绵羊肺炎支原体SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：林裕胜; 江锦秀; 张靖鹏; 游伟; 胡奇林^*

来源：福建农业学报, 2018, 33(10): 1054-1058.

DOI：10.19303/j.issn.1008-0384.2018.10.008

• 绵羊肺炎支原体
• SYBR Green Ⅰ
• 荧光定量PCR

根据GenBank公布的绵羊肺炎支原体Y-98株(No.KM435069.1)P80基因序列,利用Beacon Designer7.9软件设计1对特异性引物,建立了绵羊肺炎支原体的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测绵羊肺炎支原体,对其他羊常见病原扩增结果无特异性扩增;该方法最低检测限为10copies·μL-1,组内和组间变异系数均小于2%;采用该方法对96份临床样品进行检测,绵羊肺炎支原体的阳性率为67.7%(65/96),结果显示该方法与TaqMan实时荧光定量PCR方法检测结果一致。以上结果表明本研究建立的绵羊肺炎支原体SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于绵羊肺炎支原体的病原学检测和流行病学调查。

• 单位
  福建省农业科学院