低强度牵张应力对异丙肾上腺素诱导下牙周膜成纤维细胞炎症反应的影响

作者：王雪纯; 吴艳棋; 梅鹏; 张博钧; 朱敏^*

来源：上海口腔医学, 2022, 31(03): 225-231.

DOI：10.19439/j.sjos.2022.03.001

• 牙周膜成纤维细胞
• 牵张力
• 内质网应激
• 异丙肾上腺素
• 炎症反应

目的 ：探讨低强度牵张力对异丙肾上腺素（isoproterenol,ISO）诱导下人牙周膜成纤维细胞炎症反应的影响及其分子机制。方法：体外培养人牙周膜成纤维细胞（periodontal ligaments cells,PDLCs），给予一定浓度(0.01、0.1、1μmol/L)ISO刺激24 h，设置空白对照组，同时施加不同强度（5%、10%、15%形变量）的牵张力，利用实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测细胞内IL-1β、IL-6 mRNA的表达。设置空白対照组、ISO刺激组（0.1μmol/L）、低强度牵张力组（5%形变量）和ISO+低强度牵张力组，利用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测内质网应激相关p-PERK、PERK、p-eIF2α、eIF2α、ATF4蛋白表达量的变化。应用细胞转染技术敲低PDLCs中PERK基因的表达，RT-qPCR检测低表达PERK的牙周膜成纤维细胞在ISO及5%形变量牵张力作用下IL-1β及IL-6 mRNA的表达。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果：ISO诱导可显著上调牙周膜成纤维细胞中IL-1β及IL-6 mRNA的表达（P<0.05）；与对照组相比，5%形变量牵张力抑制ISO诱导下PDLCs中IL-1β和IL-6 mRNA的表达，差异有统计学意义（P<0.05）;Western印迹结果显示，5%形变量牵张力可抑制ISO诱导引起的PERK、eIF2α磷酸化及ATF4的表达（P<0.05）。与阴性对照组相比，ISO诱导下PERK沉默的PDLCs中IL-1β及IL-6 mRNA表达显著降低（P<0.05）。结论：5%形变量牵张力可能通过内质网应激PERK通路抑制ISO诱导下牙周膜成纤维细胞的炎症反应。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院; 上海交通大学