尼古丁所致宫内发育迟缓发生的HPA轴相关神经内分泌干扰机制研究

作者：聂华; 赵蕾; 程丹

来源：广东医学, 2016, 37(15): 2246-2250.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.2016.15.007

• 尼古丁
• 宫内发育迟缓
• 糖皮质激素受体
• 下丘脑-垂体-肾上腺轴

目的探讨孕期尼古丁暴露是否存在母源性糖皮质激素过暴露现象,以及尼古丁所致宫内发育迟缓(IUGR)发生的下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)相关神经内分泌干扰机制。方法健康Wistar雌性大鼠32只,雄性大鼠16只,将孕鼠随机分为4组,尼古丁组从孕12 d起皮下注射尼古丁0.5 mg/kg(小剂量组)、1.0 mg/kg(中剂量组)和2.0 mg/kg(大剂量组),每天分2次给予,给药容积为2 m L/kg,直至孕20 d。正常对照组给予等容量的生理盐水。7.5%乙二胺四乙酸抗凝,制备血浆,用于检测皮质酮(CORT)和促肾上腺皮质激素(ACTH)。在正常对照组和尼古丁大剂量组中各选取1只胎鼠,取胎脑、胎肾上腺和对应胎盘,用4%多聚甲醛固定后,用于HE染色观察组织形态学的变化。用荧光定量PCR和Western blot方法,分别检测海马糖皮质激素受体(GR)、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、肾上腺甾体激素急性调节蛋白和细胞色素P450侧链裂解酶(P450scc)和胎盘2型11β-羟基类固醇脱氢酶(11B-HSD-2)的mRNA和蛋白表达。结果 (1)与正常对照组相比,尼古丁组均可降低胎鼠体重(P<0.01),增加IUGR发生率(P<0.01);(2)实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,尼古丁组可增加海马GR的mRNA(大剂量组P<0.05)和蛋白(小、中剂量组P<0.05,大剂量组P<0.01)表达,降低下丘脑CRH的mRNA(大剂量组P<0.05)和蛋白(中、大剂量组P<0.05)表达,并且降低肾上腺St AR(大剂量组P<0.01)和P450scc(中剂量组P<0.05,大剂量组P<0.01)的mRNA表达;(3)ELISA和放免检测结果显示,尼古丁组胎血CORT(中、大剂量组P<0.01)和ACTH(大剂量组P<0.01)的含量均增加,同时,胎盘11β-HSD-2的mRNA(中、大剂量组P<0.05)和蛋白(中、大剂量组P<0.01)表达降低。以上结果均具有良好的剂量依赖关系;(4)HE染色结果显示,与正常对照组相比,尼古丁大剂量组胎鼠的海马神经核团有明显的增生,下丘脑的神经核团有所减少,胎盘绒毛区有明显的出血现象,肾上腺束状带细胞排列紊乱。结论尼古丁可引起IUGR,其机制与"母源性糖皮质激素过暴露"所导致的胎儿HPA轴发育异常有关。

• 单位
  武汉市妇女儿童医疗保健中心; 湖北省妇幼保健院; 湖北省人民医院