PEDV、TGEV双重Taq Man实时荧光定量PCR方法的建立及病原学调查

作者：陈秋勇; 陈渊泉; 陈如敬; 车勇良; 吴学敏; 刘玉涛; 周伦江^*; 王隆柏^*

来源：福建农业学报, 2022, 37(11): 1381-1387.

DOI：10.19303/j.issn.1008-0384.2022.011.002

• 猪流行性腹泻病毒
• 猪传染性胃肠炎病毒
• 双重荧光定量PCR
• 流行情况

【目的】实现猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速鉴别诊断，并调查分析福建省2019–2021年PEDV和TGEV流行情况。【方法】根据PEDV的N基因和TGEV的S基因序列分别设计特异性引物和标记FAM、VIC荧光报告基团的探针，建立、优化双重荧光定量PCR反应条件和体系，并检测其敏感性、特异性和重复性。应用该方法对福建省2019–2021年收集的297份疑似腹泻病料进行病原检测。【结果】建立的方法对PEDV和TGEV的最低检测限均为10拷贝·μL-1，比普通PCR检测灵敏度提高100倍；对其他常见猪病原不发生非特异性反应；批内、批间变异系数均小于1%。福建省297份临床样本检测结果显示，单PEDV感染率为88.89%，单TGEV感染率为1.01%,PEDV和TGEV混合感染率为3.37%。【结论】本研究建立的方法具有敏感性高、特异性强、稳定性好等特点。福建省内2019–2021年以PEDV感染为主，TGEV感染率低，存在PEDV、TGEV混合感染的情况。

• 单位
  福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心; 福建省农业科学院