PRRSV兰州分离株ORF3和ORF5基因的克隆与序列分析及其杆状病毒表达载体的构建

作者：赵娜; 田宏; 吴锦艳; 祁燕蓉; 满自萍; 尚佑军; 何生虎; 刘湘涛

来源：中国兽医科学, 2009, (03): 189-195.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2009.03.001

• 猪生殖与呼吸综合征病毒
• ORF3基因
• ORF5基因
• 克隆
• 杆状病毒表达载体 PRRSV
• ORF3 gene
• ORF5 gene
• cloning
• baculovirus expression vector

根据GenBank中猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中国代表株CH-1a的基因组序列,设计包含完整ORF3、ORF5基因序列的2对特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV兰州分离株(Lanzhou株)的ORF3和ORF5基因,并对其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV Lanzhou株ORF3、ORF5基因分别克隆到杆状病毒表达载体pFastBacHTA上,将经酶切及测序鉴定的阳性重组质粒pFastBacHTA-ORF3、pFastBacHTA-ORF5分别转化到DH10Bac感受态细胞。结果显示,ORF3、ORF5基因长度分别为765 bp、...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 宁夏大学; 农业部