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摘要
目的 探讨miR-137通过靶向髓系白血病1蛋白（MCL1）和谷氨酰胺转运蛋白溶质载体家族A1成员（SLC1A）5调节肺癌细胞铁死亡的机制。方法 非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系A549从美国典型培养物保藏中心获得。培养基均补充有10%胎牛血清（FBS）,在37℃的含5%CO2的潮湿空气中孵育。培养细胞以进行miR-137载体转染，直至细胞融合度达到70%～80%。将培养细胞分为对照组、miR-137转染组和miR-137沉默组。通过实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）分析细胞MCL1和SLC1A5、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）4 mRNA表达。通过双重荧光素酶报告基因测定miR-137与MCL1和SLC1A的靶向作用。通过铁测定试剂盒测量每个细胞系中的Fe2+浓度。通过线粒体超氧化物（MitoSOX）指示剂测量了细胞中MitoSOX的产生。通过相应试剂盒检测活性氧（ROS）、还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）水平。通过流式细胞仪检测细胞凋亡。通过Transwell法测定miR-137对细胞迁移、侵袭的影响。结果 miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组MCL1、GPX4和SLC1A5 mRNA表达显著升高（P0.05）。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组Fe2+浓度、MitoSOX浓度显著降低，线粒体相对膜电位显著升高（P2+浓度、MitoSOX浓度显著升高，线粒体相对膜电位显著降低（P<0.05）。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组ROS和MDA浓度显著降低，GSH浓度显著升高（P<0.05）,miR-137转染组较对照组ROS和MDA浓度显著升高，GSH浓度显著降低（P<0.05）。24、48和72 h时，miR-137转染组较miR-137沉默组和对照组细胞凋亡率显著升高（P<0.05）,72 h时miR-137沉默组较对照组细胞凋亡率显著降低（P<0.05）。miR-137沉默组较miR-137转染组和对照组细胞迁移、侵袭数量显著增多（P<0.05）,miR-137转染组较对照组细胞迁移、侵袭数量显著减少（P<0.05）。结论 miR-137可以靶向调控SLC1A5和MCL1,诱导肺癌细胞铁死亡，从而促进细胞凋亡。
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