EV71结构蛋白VP0的表达及抗体的制备

作者：李晨阳; 王弋; 古艳丽; 古亚楠; 陈海燕; 田璐; 陈丽云; 彭涛

来源：现代生物医学进展, 2013, (05): 850-853+861.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2013.05.017

• 肠道病毒71型
• 结构蛋白VP0
• 多克隆抗体 Enterovirus 71
• Structure-protein VP0
• Polyclonal antibody

目的:原核表达EV71结构蛋白VP0(VP2+VP4)并制备其多克隆抗体。方法:以肠道病毒71型(EV71)全基因组为模板,设计引物扩增出目的片段VP0,将其克隆至表达载体pET-30a(+),并转化大肠杆菌TG1,筛选出阳性克隆后进行测序。将重组表达载体pET-30a(+)-VP0转入大肠杆菌表达菌株Rosetta中。该重组菌经过IPTG诱导表达并通过SDS-PAGE电泳和Western Blot验证后,有与预期分子量大小一致的蛋白条带,并且主要以包涵体的形式存在。包涵体用6 mol/L盐酸胍溶解,经过Ni-NTA亲和层析法纯化,获得了纯度较高的目的蛋白。将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔制备了V...

• 单位
  中国科学院; 广州锐达生物科技有限公司; 呼吸疾病国家重点实验室; 中国科学院广州生物医药与健康研究院