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摘要
目的：通过研究血府逐瘀胶囊对内皮细胞氧化应激损伤的作用和机制来探究其改善下肢动脉硬化闭塞症患者症状的作用机制。方法：40例确诊并采取保守治疗的下肢动脉硬化闭塞症患者随机分成治疗组(常规治疗基础上口服血府逐瘀胶囊4周)和对照组(常规治疗),每组20例，RT-PCR检测患者血清中miR-532-5p表达量。6周龄SD大鼠随机分成血府逐瘀胶囊组(0.48 g·kg-1)和对照组，每组5只，给予相应药物干预7 d后腹主动脉采血，制备含药血清。将HCAECs随机分为对照组、氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein, ox-LDL)组、血府逐瘀组、血府逐瘀对照组、血府逐瘀+miR-532-5p抑制剂组、血府逐瘀+miR-532-5p抑制剂对照组。除对照组外，其余组均给予100 mg·L-1 ox-LDL培养24 h,并给予相应干预后CCK-8法检测细胞活力；微板法检测丙二醛(malondialdehyde, MDA)的水平；WST-1法检测总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的水平；DCFH-DA荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot检测肌动蛋白相关蛋白2(actin-related protein 2,Arp2)的表达水平；双荧光素酶报告基因检测miR-532-5p与Arp2的结合能力。结果：与治疗前比较，治疗后治疗组患者血清miR-532-5p表达水平明显上调(P<0.05);治疗后，与对照组比较，治疗组患者血清miR-532-5p表达水平明显上调(P<0.05)。与对照组比较，ox-LDL组细胞活力、SOD及miR-532-5p水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、ROS和MDA水平、Arp2蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与ox-LDL组比较，血府逐瘀组细胞活力、SOD及miR-532-5p水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、ROS和MDA水平、Arp2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与血府逐瘀组比较，血府逐瘀+miR-532-5p抑制剂组细胞活力及SOD水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、ROS和MDA水平明显升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示miR-532-5p可与Arp2直接结合，miR-532-5p抑制剂可升高Arp2蛋白表达水平(P<0.05)。结论：血府逐瘀胶囊可能通过调控miR-532-5p/Arp2通路抑制ox-LDL诱导的内皮细胞氧化应激损伤，改善下肢动脉硬化闭塞症患者的症状。
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